윤기원은 코믹한 배역을 주로 맡아온 배우로, 순풍산부인과에서 1인 다역으로 수많은 레전드 에피소드를 남기며 명품 조연으로 자리매김했다. 1991년 KBS 대학개그제를 통해 연예계에 데뷔했으나 군복무로 활동을 중단했다가, 1996년 SBS 공채 탤런트로 재출발하여 다양한 드라마와 예능 프로그램에 꾸준히 출연해왔다. 순풍산부인과 이후 인간시장, 경성스캔들, 거침없이 하이킥 등 여러 작품에서 조연으로 활약했으며, 예능 프로그램인 불타는 청춘 등에도 출연하여 폭넓은 활동 범위를 보여주었다. 코미디 연기와 캐릭터 소화력으로 관객들에게 신뢰받는 배우로 평가받고 있다. 2025년 가족의 비밀에 출연했다. 2023년 한탕에서 Kim Tae-seob 역을 맡았다. 2023년 바람개비에서 Killer 역을 맡았다.