정이서는 짧지만 강렬한 존재감으로 관객들에게 깊은 인상을 남기는 배우다. 2015년 영화 레볼루션으로 데뷔한 후, 봉준호 감독의 영화 기생충에서 피자가게 사장으로 처음 눈도장을 찍었으며, 이후 박찬욱 감독의 영화 헤어질 결심에서도 캐스팅되는 등 거장 감독들의 선택을 받아왔다. tvN 드라마 마인에서 재벌 자제와의 운명적 사랑을 그리는 당차고 할 말 많은 여인 유연 역으로 더 많은 대중에게 알려졌고, 최근 넷플릭스 원더풀스와 폭싹 속았수다 등 다양한 매체와 장르에서 입체적인 연기로 활약하고 있다. 비중의 크기와 관계없이 항상 자신의 역할에서 캐릭터에 녹아들며 강렬한 인상을 남기는 배우로, 앞으로의 다양한 도전에 관객들의 기대가 집중되고 있다. 2026년 원더풀스에서 석주란 역을 맡았다. 2025년 폭싹 속았수다에서 Song Bu-seon 역을 맡았다. 2024년 더 킬러스에서 은지 (부분 "Metamorphosis") 역을 맡았다.