정건주는 원래 배우의 꿈이 없었던 평범한 공대생으로, 부모의 뜻에 따라 한국산업기술대학교 기계설계공학과에 진학했던 인물이다. 대학 1년 후 군 입대를 했고, 전역 후 카페 아르바이트, 합기도, 요리 등 여러 경험을 쌓던 중 연기학원에 다니게 되어 우연히 배우의 길에 들어섰다. 2017년 DAY6의 뮤직비디오 '좋아합니다'로 데뷔한 후 2018년부터 웹드라마 위주로 활동해왔으며, 2019년 MBC 드라마 '어쩌다 발견한 하루'에서 이도화 역을 맡으며 대중적 인지도를 얻었다. 현재는 드라마와 영화에 꾸준히 출연하며 활발히 활동 중이며, 30대에 접어든 배우로서 새로운 매력을 선보이려는 의지를 보이고 있다. 2025년 광장에서 천해범 역을 맡았다. 2025년 내가 죽기 일주일 전에서 이홍석 역을 맡았다. 2024년 체크인 한양에서 천준화 역을 맡았다.